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質體大小加上同源臂大概3.2 3.3k 所以extension 60秒我也試過了🥲但P不來~

嗨你們好!我又有困難的研究問題求助惹!這次碰到的問題是我用超高速離心法收到的extracellular size有點詭異,我的做法是,PC12 conditioned medium抽上來之後先2000 g for 20 min preclear ,接著用20000 g for 30 min收large EV,然後再用100000 g for 60 min收small EV。

我目前是在做藥物對細胞的存活率而已~才剛第一步 在算IC50而已。
因為之前都是直接用學長姐的模板下去改數據 想要更進一步的了解為什麼用這個方式可以得到想要的結果

我目前在培養PC12細胞(我們實驗室是從新竹的食科所BCRC購買的,非從國外另外進口)我培養時是照ATCC的培養手冊來培養繼代的。
我本身知道PC12會是混合型的細胞(有的貼服有的懸浮,並且喜歡成簇)同時也是不規則的型態,但是養到後來會有如影片一樣,細胞更喜歡成簇懸浮像是細胞球一樣,同時貼附的細胞中間會像這樣有破洞(就很像是被競爭鏟起來的)
想請問這樣是因為細胞有污染;或是我的培養方式不對嗎?

向各位實驗室大佬問安,小的在脆上追蹤你們很久了💫💫
在WB上有一些問題無法解決希望可以請教你們,Wb條件 5ug protein、15ul volume 、上膠4%、下膠8%
1.band 有拖帶的問題(如附圖
2.自己配的5x dye 好像有問題
loading有時會外溢有時又不會(配方
想請問可能的原因是什麼,做好幾次了一直這樣快哭了🥲

您好 我目前就讀生科系碩二
在種96孔盤時,會出現如圖的纖維鬚鬚,曾經以為是因為使用autopipette 的管子與保護套紙面的摩擦,修正過後還是有很多鬚鬚,因此想向您們詢問還有什麼可以修正的方法?